在生物指示剂验证试验中，需确定孢子在实际灭菌条件下的D值，并测定孢子的纯度和数量。验证时，生物指示剂的微生物用量应比日常检出的微生物污染量大，耐受性强，以保证灭菌程序有更大的安全性。在较终灭菌法中，生物指示剂应放在灭菌柜的不同部位。并避免指示剂直接接触到被灭菌物品。生物指示剂按设定的条件灭菌后取出，分别置培养基中培养，确定生物指示剂中的孢子是否被*杀灭。
 

　　生物指示剂的使用秘籍：
 

　　1.将生物指示剂放入盒式灭菌器的灭菌盒中。请注意，为防止水进入生物指示剂，应将生物指示剂放在灭菌箱的网板上。
 

　　2.根据国家规定，生物学指标应放在灭菌箱的不同位置。对于SciCan盒式灭菌器，只要靠近排气孔的位置可以通过生物监控，其他位置就可以通过。因此，我们建议将生物指示剂放在灭菌盒底部的中间。
 

　　3.执行灭菌循环以完成灭菌操作并取出生物指示剂。请注意，对于SciCan盒式灭菌器，通常不包装生物指示剂，并选择无包装的周期。如果包装了生物指示剂，则应选择包装周期。
 

　　4.挤压容纳的安瓿瓶，并将其与对照管一起放入56±2℃的培养箱中。取出生物指示剂后，让其冷却至少10分钟，然后再将安瓿瓶挤入生物指示剂中，否则可能会导致安瓿瓶碎片伤人。
 

　　5. 48小时后，阅读结果。孵育后，指示管没有变色(紫色)，表明灭菌已通过。孵育后，指示管变色(黄色)，表明灭菌未通过，应及时找到灭菌失败的原因。